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Calculadora de concentração de primer PCR on-line

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A Calculadora de Concentração de Primer PCR é uma ferramenta inestimável para biólogos moleculares e técnicos. Automatiza o cálculo da concentração final de primers em uma mistura de PCR, garantindo condições de reação ideais e minimizando o potencial de erros em cálculos manuais. Ao inserir a concentração inicial do primer, o volume de primer utilizado e o volume total da reação, a calculadora fornece a concentração final com rapidez e precisão.

Fórmula da Calculadora de Concentração de Primer PCR

Para entender como funciona a calculadora, é essencial conhecer a fórmula que ela utiliza:

Concentração de iniciadores de PCR

em que:

  • C1 é a concentração inicial (estoque) do primer (em micromolar, μM)
  • V1 é o volume da solução estoque de primer que você usará (em microlitros, µL)
  • C2 é a concentração final do primer na sua reação de PCR (em µM)
  • V2 é o volume final da sua reação PCR (em µL)
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Tabela de conversão útil

Aqui estão duas tabelas úteis que fornecem referência rápida para conversões laboratoriais comuns e preparação de material de primer. Isso ajudará os pesquisadores a realizar rapidamente os cálculos necessários sem uma ferramenta separada, garantindo eficiência e precisão na configuração do PCR.

Tabela 1: Conversões Comuns de Laboratório

DeParaFator de conversão
Nanomolar (nM)Micromolar (µM)Divida por 1,000
Mililitros (mL)Microlitros (µL)Multiplique por 1,000
Microgramas (µg)Nanogramas (ng)Multiplique por 1,000
Molaridade (M)Micromolaridade (µM)Multiplique por 1,000,000

Tabela 2: Guia de Diluição de Primer

Esta tabela ajuda na preparação de diluições para estoques de primer para atingir as concentrações de trabalho desejadas.

Concentração de Estoque (µM)Concentração de Trabalho Desejada (µM)Volume de estoque (µL) para volume final de 100 µL
1000.50.5
1001.01.0
2000.50.25
2001.00.5

Exemplo de calculadora de concentração de primer PCR

  • Concentração da solução estoque (C1): 100 µM
  • Concentração Final Desejada (C2): 0.2 µM
  • Volume total de reação (V2): 50 µL
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Fórmula de cálculo:
V1 = (C2 * V2) / C1

Aplicar valores:
V1 = (0.2 * 50) / 100

Resultado:
V1 = 0.1 µL

Instrução:

  • Adicione 0.1 μL de estoque de primer à sua reação PCR para atingir a concentração desejada.

Perguntas frequentes mais comuns

Q1: Qual é a concentração ideal de primer para PCR?

A1: A concentração ideal varia, mas normalmente está entre 0.1 a 0.5 μM na mistura de reação.

Q2: Como ajusto a concentração do primer se minha reação for ineficiente?

A2: Se a PCR for ineficiente, considere ajustar a concentração do primer ligeiramente dentro da faixa ideal ou verifique a especificidade do primer e as condições da PCR.

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