PCR プライマー濃度計算ツールは、分子生物学者や技術者にとって非常に貴重なツールです。 PCR 混合物中のプライマーの最終濃度の計算を自動化し、最適な反応条件を確保し、手動計算でのエラーの可能性を最小限に抑えます。初期プライマー濃度、使用したプライマー量、および総反応量を入力することにより、計算機は最終濃度を迅速かつ正確に算出します。
PCRプライマー濃度計算式
電卓がどのように機能するかを理解するには、電卓が使用する式を知ることが不可欠です。

ここで、
- C1 はプライマーの初期(ストック)濃度です(マイクロモル、μM)
- V1 は、使用するプライマー原液の量です (マイクロリットル、μL)
- C2 は、PCR 反応におけるプライマーの最終濃度です (μM)
- V2 は PCR 反応の最終容量です (μL)
役立つ換算表
一般的な実験室での換算とプライマーストックの調製について、すぐに参照できる便利な表を2つご紹介します。これらの表は、研究者が別のツールを使わずに必要な計算を迅速に行うのに役立ちます。 効率 PCR セットアップの精度。
表 1: 一般的な研究室での変換
に | 換算係数 | |
---|---|---|
ナノモル (nM) | マイクロモル (μM) | 1,000で割る |
ミリリットル (mL) | マイクロリットル (μL) | 1,000を掛ける |
マイクログラム (μg) | ナノグラム (ng) | 1,000を掛ける |
モル濃度 (M) | マイクロモル濃度 (μM) | 1,000,000を掛ける |
表 2: プライマー希釈ガイド
この表は、所望の使用濃度を達成するためにプライマーストックの希釈液を調製するのに役立ちます。
ストック濃度 (μM) | 望ましい使用濃度 (μM) | 最終容量 100 μL に対するストック容量 (μL) |
---|---|---|
100 | 0.5 | 0.5 |
100 | 1.0 | 1.0 |
200 | 0.5 | 0.25 |
200 | 1.0 | 0.5 |
PCRプライマー濃度計算機の例
- 原液濃度 (C1): 100μM
- 望ましい最終濃度 (C2): 0.2μM
- 総反応量 (V2): 50 µL
計算式:V1 = (C2 * V2) / C1
値を適用します:V1 = (0.2 * 50) / 100
結果:V1 = 0.1 µL
命令:
- 0.1 μL のプライマーストックを PCR 反応に追加して、目的の濃度を達成します。
最も一般的な FAQ
Q1: PCR に最適なプライマー濃度はどれくらいですか?
A1: 最適な濃度は異なりますが、通常は反応混合物中で 0.1 ~ 0.5 μM です。
Q2: 反応効率が悪い場合、プライマー濃度を調整するにはどうすればよいですか?
A2: PCR 効率が悪い場合は、プライマー濃度を最適範囲内で若干調整するか、プライマーの特異性や PCR 条件を確認することを検討してください。
Q3: プライマーストックを複数の PCR 反応に再利用できますか?
A3: はい、プライマーストックは、劣化を防ぐために -20°C で適切に保管されていれば、複数の反応に再利用できます。